Membuat Media Pertumbuhan Mikroba

MEMBUAT MEDIA PERTUMBUHAN MIKROBA

Teori dasar          :

            Mikroorganisme dapat ditumbuhkan dan dikembangbiakan pada suatu substrat yang dinamakan medium. Medium untuk pertumbuhan mikroba ini memenuhi persyaratan nutrien yang dibutuhkan mikroba tersebut. Kebutuhan dasar mikroba antara lain : air, karbon, energi, mineral, dan faktor tumbuh.

            Media terdiri dari 3 macam bentuknya, yaitu : medium cairan, padatan, dan semisolid. Perbedaan ini disebabkan oleh ada tidaknya bahan pemadatan. Bahan pemadatan dapat berupa amilum, gelatin, selulosa, dan agar-agar. Agar-agar adalah media yang paling umum digunakan. Medium cairan tidak menggunakan bahan pemadat sedangkan medium padatan dan semisolid menggunakan bahan pemadat.

            Berdasarkan fungsinya media dapat dibedakan atas medium umum, selektif, dan differensial. Berdasarkan komposisi kimianya dikenal medium alami, medium semisintetis, dan medium sintetis.

            Pengertian Media

Media adalah pembenihan substrat atau dasar makanan untuk menumbuhkan dan membiakkan suatu mikroorganisme. Media yang baik bagi pemeliharaan mikroorganisme ialah yang mengandung unsure-unsur makanan yang diperlukan, dapat berupa garam-garam anorganik seperti protein, peptone, asam-asam amino dan vitamin-vitamin. Bahan-bahan makanan yang disediakan untuk menumbuhkan mikroorganisme disebut kultur media. Sedangkan mikroorganisme yang tumbuh dan berkembang biak pada suatu kultur media disebut kultur.

            Fungsi Media

Media dapat berfungsi untuk membiakkan, mengasingkan dan meyimpan mikroorganisme dalam waktu yang lama di laboratorium. Media juga dapat berfungsi untuk mempelajari sifat-sifat koloni/pertumbuhan, sifat-sifat biokimiawi mikroorganisme. Selain itu dalam laboratorium mikrobiologi kedokteran dapat berfungsi untuk pembuatan antigen, toksin dan untuk pasasi kuman dengan tujuan perubahan virulensi dan lain-lain.

           

Syarat-syarat membuat media

Syarat-syarat yang perlu diperhatikan dalam membuat media adalah :

1. Media harus mengandung semua unsur makanan yang diperlukan untuk pertumbuhan dan perkembangbiakan mikroorganisme.
2. Media harus mempunyai tekanan osmosa, tegangan permukaan, dan pH yang sesuai dengan kebutuhan mikroorganisme.
3. Media harus dalam keadaan steril sebelum ditanami mikroorganisme yang dimaksud, jadi tidak ditumbuhi oleh mikroorganisme yang lain yang tidak diharapkan

Komposisi Media

Di Laboratorium mikrobiologi, untuk pekerjaan rutin biasanya dibuatkan media standar yang terdiri dari : kaldu, pepton, karbohidrat. Jika diperlukan media padat, dapat ditambahkan agar. Media standar ini disediakan untuk mempermudah macam-macam media yang dikehendaki sesuai dengan tujuannya. Misalnya membuat media agar miring, untuk membiakkan mikroorganisme, media agar darah untuk membiakkan kuman yang memerlukan darah, media agar dam lempeng, untuk melihat hemolisis dan lain-lain.

            Pada hakekatnya komposisi media yang baik adalah sesuai dengan kebutuhan mikroorganisme seperti pada habitat aslinya (kondisi alamiah). Oleh karena itu, jika ingin membiakkan mikroorganisme yang dapat hidup di usus manusia misalnya, maka harus menggunakan media tertentu yang dapat hidup diusus manusia misalnya, maka harus menggunakan media tertentu yang dilakukan dengan bermacam-macam media diperkaya, media selektif , dan media differensial. Sedangkan pengereman (inkubasi) media harus dilakukan pada suhu 37⁰ C, yaitu suhu yang sesuai dengan tubuh manusia.

            Dewasa ini untuk keperluan penelitian maupun pekerjaan di laboratorium banyak dipermudah dengan adanya bermacam-macam media yang tersedia dalam bentuk serbuk kering. Serbuk kering ini sudah siap dipakai.artinya tidak perlu lagi menentukan pH nya, sebab hal ini sudah dilakukan terlebih dahulu pada pembuatan serbuk. Sehingga untuk menyiapkan media cukup mengikuti aturan pakai yang dituliskan pada tabel. Misalnya sekian gram serbuk kering dilarutkan dalam sekian liter mililiter air suling, kemudian disterilkan.

Tujuan

1. Membuat media Kaldu Nutrisi Agar
2. Membuat media Toge Agar

Alat dan Bahan

1. Timbangan
2. Kaca Arloji
3. Sendok
4. Gelas Ukur
5. Beaker Glass
6. Tabung Reaksi
7. Batang Pengaduk
8. pH Indikator
9. Corong
10. Kertas saring
11. Kapas
12. Pembakar
13. Autoclave
14. Cawan Petri
15. Baki atau nampan
16. Daging Lembu ½ kg
17. Toge
18. Agar Powder
19. Vaselin
20. Aquades
21. Bacto Pepton
22. Lisol
23. Sukrosa

Prosedur

1. Kaldu Nutrisi Agar
1. Buatlah ekstrak daging lembu (daging 0,5 kg direbus dalam air 1 liter hingga volume air menjadi ½ nya atau selama 1-2 jam)
2. Saringlah ekstrak daging dengan kertas saring, kemudian tambahkan aquades hingga volume menjadi 1 liter
3. Masukkan bacto pepton 5 gram dan agar powder 15 gram
4. Panaskan suspensi tersebut sehingga mendidih selama 20 menit
5. Ukur pH, usahakan pH menjadi 6,8-7,3
6. Tuangkan kedalam tabung reaksi : 10 ml untuk agar tegak dan 5 ml untuk agar miring
7. Tutup semua tabung dengan kapas sebaik mungkin
8. Siap untuk disetrilisasi.
2. Kaldu Toge Agar
1. Buatlah ekstrak toge (dari 100gr toge digerus atau dihaluskan dan diambil airnya)
2. Saring ekstrak toge tersebut dengan kertas saring dan tambahkan aquades sehingga volume menjadi 1 liter
3. Tambahkan sukrosa 60 gr dan agar powder 15 gr
4. Panaskan suspensi tersebut sampai mendidih selama 20 menit .
5. Masukkan kedalam tabung reaksi sebanyak 10ml untuk agar tegak dan 5 ml untuk agar miring.
6. Tutup dengan kapas sebaik mungkin
7. Siap untuk disterilisasi.

Pengamatan koloni bakteri dan jamur

PENGAMATAN KOLONI BAKTERI DAN JAMUR

Teori Dasar                :

            Disekitar kita mikroorganisme mudah dijumpai, seperti diudara, diantara helaian rambut, disela-sela gigi, dijari tangan, dalam usus besar, dipermukaan kulit, dalam makanan dan kemungkinan dalam minuman manusia. Untuk mempelajari koloni serta sifat bakteri dan jamur kita perlu menumbuhkannya pada medium.

Tujuan                       :

1.      Mempelajari morfologi koloni bakteri

2.      Mempelajari morfologi koloni jamur

Alat dan Bahan         :

1.      Lampu bunsen/spiritus

2.      Korek api

3.      Jarum inokulasi

4.      Petridish yang sudah disterilkan

5.      Medium Kaldu Nutrisi agar

6.      Medium toge agar

7.      Cotton bud(pembersih telinga)

Prosedur Kerja         :

1.      Panaskan air dalam beaker glass sehingga mencapai suhu 45-50⁰ C

2.      Masukkan tabung reaksi yang berisi medium (khusus untuk medium tegak) kedalam beaker glass supaya medium cair

3.      Biarkan 5 menit kemudian tuangkan kedalam petridish

4.      Beri label, nama kelompok dan nama medium

5.      Lakukan perlakuan sebagai berikut:

-          Membiarkan cawan petri yang berisi medium kaldu nutrisi agar dalam keadaan terbuka selama 20 menit dan toge agar selama 1 jam. Segera tutup kembali

-          Mengucapkan kata-kata dengan jarak 5-10cm dekat medium yang terbuka selama 3 menit, segera tutup kembali.

6.      Semua lempeng agar tersebut diinkubasi pada suhu kamar selama 2 - 3x24 jam, amati setiap koloni mikroba yang tumbuh setiap hari.

7.      Lakukan pengamatan morfologi koloni bakteri yang meliputi:

-          Warna

-          Bentuk koloni

-          Ukuran diameter koloni

-          Mengkilat atau suram

8.      Hitunglah jumlah dan macam koloni bakteri dan jamur yang tumbuh pada medium

9.      Buatlah label pengamatan

Pertanyaan dan Tugas

Perbedaan apa yang terlihat pada koloni bakteri dan jamur?

Pengamatan Jamur pada makanan

PENGAMATAN JAMUR PADA MAKANAN

Teori dasar                :

Jamur memiliki ciri-ciri sebagai berikut: mempunyai inti sel, membran inti sel sempurna, tidak mempunyai klorofil, bentuk uniseluler atau multiseluler, berkembang biak dengan spora, hidupnya bersifat heterotrof, dan dapat juga sebagai parasit atau saprofit. Jamur dapat menguntungkan dan dapat juga merugikan. Perananya dalam makanan antara lain terdapat pada tempe, oncom, tape, keju, yang dapat menguntungkan manusia tetapi ada juga yang merugikan seperti terdapat pada nasi, kue, roti, buah-buahan, dan lain-lain

Tujuan                       :

Mengamati morfologi jamur yang terdapat pada makanan

Alat dan Bahan         :

1.      Mikroskop

2.      Objek glass dan Cover Glass

3.      Jarum Pentul

4.      Pipet tetes

5.      Jamur Nasi

6.      Jamur roti

7.      Jamur Tongkol jagung

8.      Jamur tempe

9.      Aquades steril

Prosedur Kerja         :

1.      Ambil objek glass bersih dan bebas kotoran atau lemak

2.      Ambillah sehelai jamur dari masing-masing bahan pengamatan dengan menggunakan jarum pentul dan letakkan diatas objek glass.

3.      Teteskan dengan setetes aquades pada kaca benda.

4.      Tutup dengan cover glass.

5.      Buatlah label untuk berbagai jenis jamur berbeda

6.      Amati dibawah mikroskop.

7.       Gambarkan hasil pengamatan dan beri keterangannya : nama jamur, Rhizoid, spyrogium? Tangkai spyrogium? Spora? Stolon? Hyfa? Konidiosfor? Konidia? Dan bagian-bagian jamur lainnya.

No	Jamur dari ....	Nama Jamur	Gambar dan Keterangan
1 2 3 4

Tugas dan Pembahasan       :

1.      Mengapa makanan dapat ditumbuhi jamur?

2.      Bagaimana caranya mengatasi orang yang keracunan jamur?

Pembuatan Kompos

PEMBUATAN KOMPOS

Teori Dasar                   :

            Sampah merupakan materi yang tidak dapat dipergunakan secara produktif atau tidak dapat menghasilkan sesuatu produk yang bersifat baru. Akan tetapi sampah dapat diproses kembali dengan suatu metode yang disebut ”metode 3R” ( Recycle, Reuse, dan Reduce ). 

Recycle adalah suatu proses penampungan sampah atau materi yang tidak dapat digunakan kembali kedalam suatu tempat / wadah yang bersifat sementara, untuk kemudian sampah yang dikumpulkan tadi akan diseleksi kembali atau memasuki tahap Reuse

Reuse adalah ialah proses pemilihan sampah yang dianggap masih berguna atau masih dapat dipergunakan untuk membuat materi yang lainnya. Kemudian sisa dari total sampah yang diolah tadi akan memasuki tahap terakhir yaitu Reduce yaitu tahap pengurangan atau pemusnahan. Sampah yang dianggap benar – benar tidak produktif atau tidak berguna lagi akan dimusnahkan.

Sampah sendiri terbagi atas 2 jenis sampah yaitu : sampah organik dan sampah anorganik.

Sampah organik adalah sampah yang berasal dari makhluk hidup dan dapat diuraikan oleh organisme pengurai sedangkan sampah anorganik adalah sampah yang tidak dapat diuraikan oleh organisme pengurai.

Tujuan                       :

Mengetahui cara dan proses pembuatan kompos

Bahan dan Alat  :

1. Sampah organik 2 kg
2. Pupuk Cair EM4, konsentrasi 20% (dengan menambahkan 20 ml Larutan EM4 dengan 100ml air).
3. Dedak ½ kg
4. Gula 1 ons
5. Air secukupnya
6. Plastik Pembungkus
7. Ember Plastik yang tertutup
8. Pisau
9. Termometer

Prosedur Kerja              :

1. Cacah sampah hingga berukuran 2 cm
2. Masukkan sampah kedalam ember plastik
3. Tambahkan dedak, gula dan air sedikit demi sedikit, sambil diaduk
4. Air berfungsi untuk merekatkan bahan, diberikan jangan terlalu banyak
5. Tambahkan EM4 sambil diaduk hingga rata
6. Tutup ember dan bungkus plastik
7. Setiap 2 hari lakukan pengadukan (pembalikan)terhadap kompos,  lakukan pengukuran suhu
8. Inkubasikan selama 1-2 minggu
9. Lakukan pengamatan dan catat hasil pengamatan

Hasil Dan Pembahasan          :

No	Kelompok	Perubahan pada kompos			Keterangan
		Suhu	Warna	Bentuk
1
2
3
Dst..

Pertanyaan

1. Adakah perubahan suhu bahan kompos dari awal sampai akhir pengamatan
2. Kumpulkan data pengamatan beberapa tekstur bahan kompos

Pembuatan pupuk cair EM4

PEMBUATAN PUPUK CAIR  – EM4

Teori Dasar                  :

Banyak cara untuk membuat "mikroba efektif" untuk mempercepat proses pembuatan kompos. Salah satu di antaranya adalah yang kami tulis di bawah ini. Pengalaman teman-teman kami membuat EM4 dengan isi usus binatang telah menimbulkan bau yang kurang sedap sehingga kami memilih jalan pembuatan yang sifatnya vegetarian, dari bahan-bahan tanaman yang mudah dan cepat busuk.

Penemuan yang sangat berharga untuk pertanian mandiri ini, awalnya adalah orang Jepang, bernama Teruo Higa pada tahun 1970 -- kini telah banyak diterapkan oleh para petani modern. Tapi masih banyak pula yang belum melakukannya karena lebih percaya pada pupuk kimia yang dirasa "lebih praktis" tapi sesungguhnya tidak sehat baik untuk tanah, tanaman maupun untuk kita manusia.

Tujuan                                     :

Untuk mengetahui cara dan proses pembuatan pupuk cair ”EM4”

Untuk mengetahui kegunaan pupuk cair ”EM4”

Bahan dan Alat           :

1. Sampah sayur, terutama kacang-kacangan
2. Kulit buah-buahan (papaya, pisang, rambutan, mangga, dsb.)
3. Bekatul , secukupnya
4. Gula merah, sedikit saja
5. Air beras, secukupnya
6. Ember ukuran sedang
7. Cetok(sekop kecil pengaduk semen)

Cara membuat                      :

1. Sampah sayur, kulit buah-buahan dan bekatul dicampurkan. Tempatkan misalnya di dalam sebuah ember atau penampung yang lain. Tutup. Sambil kadang-kadang diaduk, biarkan selama satu minggu sampai membusuk sehingga menjadi EM1. EM singkatan dari Effective Microorganism, yaitu jasad renik "ganas" yang akan mempercepat proses pengomposan. Ditengarai dengan angka 1 karena inilah cairan mikroorganisme yang terbentuk setelah mengalami dekomposisi selama satu minggu.
2. Cairan EM1 dicampur dengan sampah sayur dan kulit buah-buahan. Kemudian didiamkan lagi selama satu minggu. Cairan baru yang terbentuk disebut dengan EM2.
3. Cairan EM2 dicampurkan dengan bekatul, gula merah dan air beras. Dan didiamkan lagi selama satu minggu sehingga menjadi EM3.
4. Diamkan lagi selama satu minggu tanpa menambahkan apa-apa. Cairan itu telah menjadi EM4.

NB: “bekatul” atau dedak merupakan pakan ternak, adalah bagian luar atau kulit ari dari beras

yang merupakan hasil sampingan dari proses penggilingan nasi.

Hasil dan Pembahasan

1.

2.

Pengamatan Bakteri pada Bintil akar

Judul              : Pengamatan Bakterioid Pada Bintil Akar Kacang-Kacangan.

Bahan             : 1. Bintil akar tanaman buncis ( Phaseolus vulgaris ), kacang hijau ( Vigna radiata )

                          2. Alkohol 70%

                          3. H2O2

                          4. Aquades

                          5. Pewarna karbon fauchsin.

Alat                 : 1. Objek Glass

                          2. Mikroskop

                          3. Lampu Bunsen

                          4. Pisau Silet

                          5. Pinset

                          6. Petridish

                          7. Botol Semprot

Metode :

1. Bintil akar disterilisasi dengan merendamnya kedalam alkohol 70% selama 10 detik, H2O2 selama 3 menit, aquadesh selama 5 menit.
2. Bintil disayat tipis, diletakkan di objek glass, ditekan perlahan, di smear, dikeringanginkan.
3. Difiksasi dengan melewatkan di atas api bunsen.
4. Diwarnai dengan karbon Fachsin (5 detik), kemudian dicuci dengan aquadesh mengalir secara perlahan dan dikeringkan.
5. Diamati di bawah mikroskop :
1. Gambarkan bakteroid dari rhizobium pada kedua kacang-kacangan !
2. Apakah bakteroid dari rhizobium pada kedua kacang-kacangan sama ?

Kesimpulan :

            1.

            2.

Pembuatan Nata de Coco

Tujuan             = Mengetahui Pembuatan Nata De Coco

Bahan              =          Air Kelapa                   = 500 ml

                                    Gula Pasir                    = 5 gr

                                    ZA                               = 2,5 gr

                                    Asam Sulfat 96%        = 5 ml

                                    Starter                                     = 50 ml

Prosedur Kerja :

1. Air Kelapa direbus, ditambahkan gula pasir dan ZA biarkan mendidih.
2. Setelah mendidih, tambahkan cuka, lalu angkat
3. Masukkan selagi panas kedalam wadah , dan ditutup
4. Biarkan 1-2 jam
5. Tambahkan starter, wadah ditutup dan dibungkus rapat
6. Fermentasi selama 1 minggu (7hari).

Pembuatan Kecap

BAHAN:
1 kg kedelai putih atau hitam
3 gr ragi tempe
3 lbr daun salam
2 btg serai
3 Daun jeruk 1 lembar
4 cm lengkuas
1 sdt pokak
6 kg gula merah
1 ½ lt air untuk melarutkan gula merah
800 gr garam untuk 4 liter air

CARA MEMBUAT:

·  Cuci kedelai dan rendam dalam 3 liter air selama satu malam. Kemudian rebus sampai kulit kedelai menjadi lunak. Tiriskan, dinginkan di tampah.

·  Beri ragi tempe pada kedelai yang didinginkan. Aduk hingga rata dan simpan pada suhu ruang (25-30° Celcius) selama 3-5 hari.

·  Setelah kedelai ditumbuhi jamur yang berwarna putih merata, tambahkan larutan garam. Tempatkan dalam suatu wadah dan biarkan selama 3-4 minggu pada suhu ruang. Batas maksimum proses penggaraman adalah dua bulan.

·  Segera tuangkan air bersih, masak hingga mendidih lalu saring.

· Masukkan kembali hasil saringan, tambahkan gula merah dan bumbu-bumbu. Bumbu ini (kecuali daun salam, daun jeruk dan serai) digiling halus dulu dan campur hingga rata. Banyaknya pemakaian gula merah tergantung untuk kecap asin atau kecap manis (lihat: catatan).

·  Setelah semua bumbu dicampurkan ke dalam hasil saringan, masak sambil terus diaduk-aduk. Perebusan dihentikan apabila sudah mendidih dan tidak berbentuk buih lagi.

·  Setelah adonan tersebut masak, dinginkan dan saring dengan kain saring.

·  Kecap siap untuk dikemas.

CATATAN:

·  Penambahan gula merah untuk kecap manis setiap 1 ltr hasil saringan membutuhkan 2 kg gula merah.

·  Penambahan gula merah untuk kecap asin setiap 1 ltr hasil saringan membutuhkan 2 ons gula merah.

·  Pemberian ragi harus sesuai jumlahnya dengan banyaknya kedelai, agar tidak menimbulkan kegagalan jamur yang tumbuh.

·  Setelah direbus dan ditiriskan, kedelai harus didinginkan dengan sempurna. Bila tidak ragi yang ditebarkan di atasnya akan mati.

·  Bahan baku untuk pembuatan kecap, selain dari kacang kedelai dapat juga dari biji kecipir, dengan proses pembuatan yang sama.

PEMBUATAN TEMPE

Tujuan             =  Mengetahui Pembuatan Tempe

Bahan              =          Kacang kedelai           = 1 kg

                                    Ragi                             = 2 gr

                                    Plastik                        

Prosedur Kerja :

1. Cuci bersih kacang kedelai dan rendam selama 24 jam
2. Setelah direndam selama 24 jam, kacang kedelai terlihat mekar
3. Mulailah meremas-remas kacang kedelai agar kulit arinya lepas
4. Setelah bersih, tuangkan kacang kedelai ke dalam panci dan beri air secukupnya. Rebus kacang kedelai selama kurang lebih 30 menit. Selama kacang kedelai direbus akan muncul buih putih
5. Setelah direbus selama 30 menit, buang air yang tersisa di dalam panci. Kemudian, taruh kembali panci yang tinggal berisikan kacang kedelai diatas kompor. Aduk-aduk, jangan sampai hangus. Proses ini dilakukan untuk mengeringkan kacang kedelai. Jangan terlalu lama - karena kacang mudah hangus
6. Tuang kacang kedelai ke wadah yang memudahkan kacang kedelai menjadi dingin
7. Setelah dingin, taburkan ragi tempe sebanyak 2 gram dan aduk rata
8. Siapkan plastik dengan ukuran sesuai selera. Masukkan kacang kedelai ke dalam plastik hingga ketebalan kira-kira 2-3 cm
9. Tutup plastik
10. Kemudian lubangi plastik yang telah berisi kacang kedelai dengan menggunakan pisau - kira-kira 8 lubang untuk setiap sisi atas dan sisi bawah
11. Simpan tempe di dalam lemari (lemari dapur). Alas yang dipakai untuk menyimpan adalah rak lemari es yang diganjal bagian bawahnya, sehingga ada sirkulasi udara. Diamkan selama kurang lebih 36 jam.

 Setelah 36 jam, tempe siap diolah